分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用及保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度具有重要作用。為了保證測試結果的準確性及可靠性，新制造、使用中和修理后的分光光度計都應定期進行檢定。檢定不合格的儀器還要進行及時調整。分光光度計的使用步驟：
1、預熱儀器：
為使測定穩定，將電源開關打開，使儀器預熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。
2、選定波長：
根據實驗要求，轉動波長調節器，使指針指示所需要的單色光波長。
3、固定靈敏度檔：
根據有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
4、調節“0”點：
輕輕旋動調“0”電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。
5、調節T=100%：
將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，有色溶液放在其它格內，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉動光量調節器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。
6、測定：
輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A，讀數后，打開比色皿暗箱蓋。
7、關機：
實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
